На фотографии популярные и научные книги, написанные Е.В. Котенковой

В питомнике проводится научная и научно-прикладная работа с карликовыми кроликами.
Нами совместно с Викторией Крутовой были выполнены эксперименты по изучению времени появления у карликовых кроликов индивидуального запаха в онтогенезе. Показано, что индивидуальный запах начинает формироваться с конца третьих-начала четвертых суток жизни крольчонка и его формирование завершается к шестым суткам.

При изучении формирования индивидуального запаха для повышения достоверности полученных данных в опытах были использованы две методики: модификация методики «привыкания» (habituation) (реципиенты запаха - кролики) и методика кинологической идентификации запахов. Методика «habituation» широко используется для изучения индивидуального распознавания запахов взрослых особей у грызунов разных видов. На старте экспериментальному животному предъявляют запах особи своего вида. После того, как исследовательская реакция животного на этот запах угасает, ему предъявляют запах другой особи того же пола. Результаты опытов объясняют, исходя из предположения, что если животное способно различить два предъявляемых ему запаха, то второй вызовет возрастание исследовательской реакции по сравнению с тем запахом, интерес к которому снизился. В опытах карликовым кроликам в клетках, где они постоянно содержались, предъявляли мочу крольчат, нанесенную на фильтровальную бумагу. Кружок из фильтровальной бумаги с нанесенной на нее мочой, помещали в стандартные стеклянные чашки Петри. На старте животному предъявляли чашку Петри с мочой одного крольчонка, а когда его исследовательская реакция в ответ на запах угасала, источник запаха убирали. Затем в клетку помещали два источника запаха: один – тот, который предъявляли на старте, вторым служила чашка Петри с мочой другого крольчонка того же пола и возраста. Время исследования запахов фиксировали с помощью секундомеров. Опыты проводили через день. Взрослым кроликам предъявляли мочу крольчат в возрасте двух, четырех, шести и т.д. до восемнадцати суток. Проведено две серии опытов. Мочу собирали у крольчат на фильтровальную бумагу после массирования их аногенитальной области. Донорами запаха в первой серии тестов были 12 крольчат из трех пометов, возраст которых различался не более, чем на 12 часов. Во второй серии тестов использовано 8 крольчат из трех пометов, разница в возрасте составляла не более 18 час. Реципиентами запаха служили 15 взрослых самцов и самок карликового кролика. В первой серии проведено 103 теста (в первый день экспериментальной серии 7, в последующие дни – по 12 ежедневно). Во второй – 84 теста, ежедневно по 12 опытов начиная, через день, с двух дневного возраста крольчат-доноров мочи. Результаты тестов статистически обработаны с помощью непараметрического критерия Манн-Уитни (программа CSS).
Метод лабораторной кинологический идентификации запахов разработан специалистами экспертно-криминологического центра МВД России и применяется криминалистами. Опыты по этой методике проведены Викторией Крутовой. Метод основан на использовании специально обученных собак-биодетекторов запахов. В процессе дрессировки у собак вырабатывается условнорефлекторная поведенческая реакция. Собака оповещает исследователя об обнаружении определенного запаха лаем или определенной позой (садится рядом с искомым образцом). В помещении для работы с собаками предусмотрено место для привязи собак (стартовое место), место для исследователей (дрессировщика и помощника). На стартовом месте располагается исходный (стартовый) образец запаха. В наших опытах пробы запаха были адсорбированы на фильтровальной бумаге, которую помещали в полулитровые банки. Перед проведением опытов банки помещали в селективный ряд. Такой ряд состоял из 10 элементов, расставленных по кругу. Эталонный (тестовый) образец и стартовый получены от одной особи. Помимо эталонного в ряду находился один или два проверяемых образца, идентичных стартовому. На остальные места селективного ряда ставят банки с контрольно-вспомогательными образцами (в наших опытах с запахом мочи других крольчат). Процедура эксперимента такова: на стартовом месте в течение 1 мин собаке дают нюхать стартовый образец запаха, после чего ведущий проводит ее на поводке вдоль ряда расставленных банок. Собака, последовательно обнюхивая образцы, подает стереотипный условнорефлекторный сигнал при обнаружении в одной из банок индивидуального запаха, идентичного предъявленному на старте. Подробно метод кинологической идентификации запахов описан в работе Соколова, Сулимова, Крутовой (1990). В наших опытах использоапно 3 обученных собаки (шпицы линейного разведения из питомника «Серебро России»). Проведено 42 опыта. Пробы мочи для кинологической идентификации собраны у 10 крольчат, начиная со второго по шестой дни после рождения. Для сбора мочи крольчат помещали в небольшие металлические контейнеры, в которых находилось 5-6 слоев фильтровальной бумаги. Образцы мочи после сбора и до проведения эксперимента хранили в замороженном состоянии, завернув в фольгу. Все операции по сбору и консервации запахов с целью предотвращения попадания на них запаха экспериментатора проводили с помощью пинцетов защищенными с помощью резиновых перчаток руками. Перчатки и пинцеты меняли или дезодорировали после сбора каждого образца.
В двух сериях экспериментов взрослым карликовым кроликам предъявляли два источника запаха, одним из которых была моча одного крольчонка, а другим – моча другого крольчонка того же пола и возраста. В ходе экспериментов выявлены существенные индивидуальные различия в ответ на предъявляемые запахи. Одни кролики обнюхивали источники запаха достаточно долго (65 - 100 сек), у других время их исследования было непродолжительным (3 – 15 сек). Время исследования стартового запаха мочи крольчонка составляло от 3 до 100 сек. В первой серии тестов взрослые кролики проявляли повышенный интерес к источнику запаха мочи второго крольчонка уже с первого дня экспериментов. После снижения исследовательской активности по отношению к стартовому запаху (то есть когда возраст крольчат – доноров мочи был равен двум суткам), они достоверно дольше исследовали новый запах. При парном предъявлении двух источников запаха кролики исследовали “стартовый запах” в течение 1-7 сек, продолжительность исследования второго запаха составляла 6 – 100 сек. В целом картина существенно не изменялась и в последующие дни проведения опытов. Статистическая обработка показала достоверные различия во времени исследования двух источников запаха при их одновременном предъявлении, при этом “новый” запах исследовался достоверно дольше, чем “стартовый”. Во второй серии картина несколько отличалась. Взрослые кролики практически не проявляли интерес к источникам запаха мочи крольчат в возрасте 2 и 4 суток. Время исследования запахов составляло 0,5-2 сек, а время исследования стартового запаха также не превышало 2 сек. Ситуация резко изменилась, когда крольчатам исполнилось 6 суток. С этого момента время исследования стартового запаха, а также двух предъявляемых в эксперименте запахов значительно увеличилось. Начиная с 6 суток и до 16 суток (исключение составили опыты, в которых крольчата-доноры были в возрасте 8 суток) кролики достоверно дольше исследовали “новый” запах по сравнению с предъявляемым на старте. Такие различия не позволили нам объединить результаты двух этих серий для совместной обработки. Для уточнения полученных результатов была использована методика кинологической идентификации запахов. Опыты, проведенные с дрессированными собаками, показали, что собаки не опознают индивидуальные запахи крольчат до 4-х суточного возраста. Когда крольчатам-донорам мочи исполняется 4 суток, собаки чаще правильно идентифицируют индивидуальный запах крольчонка. Однако собаки начинают без затруднений (в 100 % случаев) выбирать нужный (предъявляемый на старте) индивидуальный запах лишь когда крольчатам – донорам мочи исполняется 6 суток. Эти результаты полностью совпадают с данными, полученными при использовании кроликов-реципиентов во второй серии опытов. Полученная разница в результатах при использовании в экспериментах в качестве реципиентов взрослых кроликов может объясняться: а) различным “физиологическим” возрастом крольчат в момент рождения в разные сезоны года; б) незначительной разницей в возрасте крольчат – доноров мочи, которые использовались в первой и второй сериях экспериментов. Так, “двухсуточным” крольчатам во время сбора мочи могло быть от 24 до 48 часов, что и могло сказаться на полученных результатах. Отсутствие достоверных различий во времени исследования запахов мочи 8-суточных крольчат во второй серии экспериментов могло быть связано с небольшим числом опытов. При этом тенденция более продолжительного исследования “нового” запаха сохранялась. Опыты с незрелорождающимися детенышами крольчат показали, что в момент рождения и спустя короткое время после него индивидуальный запах в их моче отсутствует. Индивидуальный запах начинает формироваться с конца третьих-начала четвертых суток жизни крольчонка и его формирование завершается к шестым суткам. Это совпадает с началом формирования волосяного покрова детенышей. Достоверность выводов подтверждается использованием в опытах как традиционного метода изучения обонятельных сигналов, в котором используется генетически обусловленная реакция испытуемого животного на запахи доноров, так и метода, где в качестве реципиентов запаха применяли собак, у которых был выработан условно-рефлекторный стереотип поведения для распознавания индивидуальных запахов. Так как результаты полученные с помощью двух методик совпадали, можно предположить, что разные виды млекопитающих при индивидуальном распознавании особей по обонятельным сигналам используют одни и те же компоненты запаха, что позволяет говорить об универсальности кодирования индивидуальных запахов.
Проведено описание онтогенеза поведения карликовых крольчат (использовано 4 помета численностью от 2 до 4 детенышей) и их развития в онтогенезе, что позволило сопоставить время появления индивидуального запаха с определенными особенностями развития, в частности с появлением волосяного покрова. Эти материалы были использованы при написании учебного пособия, опубликованного в 2002 году. На основании этих результатов сделан доклад на конференции «Животные в городе», Москва, 15-17 апреля 2002 года и стендовое сообщение на 7 съезде Териологического общества, Москва, 6-7 февраля 2003 года.

Результаты исследований опубликованы.
1. Котенкова Е.В., Орленева О.Г. Содержание, кормление и разведение карликовых кроликов в лабораторных и домашних условиях//Животные в городе. Материалы научно-практической конференции. М., 2000. С.176-178.

2. Котенкова Е.В., Крутова В.И. Формироапние индивидуального запаха в онтогенезе у кроликов. Териофауна России и сопредельных территорий. 7 съезд Териологического общества. Материалы международного совещания 6-7 февраля 2003 г. С.177.

3. Котенкова Е.В. Карликовые кролики как лабораторные животные: использование в эксперименте для изучения формирования индивидуального запаха в онтогенезе. Животные в городе. Материала 2-ой научно-практической конференции. 2003. С.231-233.

4. Котенкова Е.В. Разведение карликовых кроликов и опыт их использования для проведения практических занятий со школьниками//Зоокультура и биологические ресурсы. Материалы научно-практической конференции. 4-6 февраля 2004 года. Москва, 2005. С.228-230.

5. Е.В. Котенкова, В.И. Крутова, Е.В. Федосов. Формирование индивидуального запаха в онтогенезе у кроликов // Успехи современной биологии. 2007. Т.127. №1. С.107-111.

6. Федосов Е. В., Соктин А.А., Котенкова Е.В. Влияние самки на рост и развитие крольчат в период, предшествующий половому созреванию // Териофауна России и сопредельных территорий. Материалы международного совещания 31 января – 2 февраля 2007. Москва. 2007. С.518.

7. Ушакова Н.А., Е.В. Котенкова, В.И., Федосов Е.В. Копрофагия у кроликов как механизм передачи симбионтов от матери детенышам // Фундаментальные и прикладные аспекты исследования симбиотических систем. Материалы Всероссийской конференции с международным участием. 25-27 сентября, Саратов. 2007. С. 49.

8. Федосов Е.В. Этограмма карликовых кроликов и ее использование для сравнительного анализа поведения крольчат при разных условиях содержания // Материалы IV-ой Всероссийской конференции по поведению животных. 29 октября-1 ноября 2007 г., Москва. 2007. C. 138-139.

9. Федосов Е. В. Влияние матери на рост и развитие крольчат в период, предшествующий половому созреванию // Биология – наука ХХI века. 10-я Международная Пущинская школа-конференция молодых ученых. Сборник тезисов. Пущино, 2007.

На главную
Научная работа Е.В. Котенковой, приглашение в аспирантуру для биологов
Напишите мне